Luciferase Transfection πρωτόκολλο

Firefly βιοφωταύγεια έχει συλλάβει πάντα την ανθρώπινη φαντασία . Το 1986 , ερευνητές του Πανεπιστημίου της Καλιφόρνια , Σαν Ντιέγκο , κατέλαβε τη γενετική και χημική μέθοδο για χρήση από μοριακούς βιολόγους . Βρήκαν ότι λουσιφεράσης πυγολαμπίδας μετατρέπει λουσιφερίνη προς οξυ- λουσιφεράση και παράγει το βιοφωταύγεια . Ορισμοί
Η

Ένα γονίδιο - μια αλληλουχία δεοξυριβονουκλεϊκού οξέως ( DNA) σε κύτταρα - παράγει μια συγκεκριμένη πρωτεΐνη , σε αυτήν την περίπτωση λουσιφεράσης. Το γονίδιο της λουσιφεράσης μπορεί να απομονωθεί και να τοποθετηθεί σε ένα μικρό κομμάτι του DNA - ένα πλασμίδιο - για επιμόλυνση σε ένα κύτταρο . Ένας προαγωγός είναι μία αλληλουχία DNA που ελέγχει την ποσότητα της λουσιφεράσης που παράγεται από το γονίδιο
εικόνων Μέθοδοι
Η

μεθόδους Επιμόλυνσης - . Τρόπους για να θέσει πλασμιδίων σε κύτταρα - μπορεί να ποικίλει σύμφωνα με το πείραμα . Άλατα , λιπίδια και ηλεκτρική δύναμη είναι τρόποι για να δημιουργήσετε τρύπες που επιτρέπουν το πλασμίδιο λουσιφεράσης να εισέλθει στο κύτταρο και να παράγουν λουσιφεράση . Τα απαιτούμενα αντιδραστήρια μπορεί να γίνει στο εργαστήριο ή αγοράζονται ως εξαρτήσεις .

Η Χρησιμοποιεί
Η

Η δοκιμασία ανταποκριτή λουσιφεράσης χρησιμοποιείται από μοριακούς βιολόγους για να χαρακτηρίσει τη δύναμη της διαφορετικούς υποκινητές σε λουσιφεράση πλασμίδια . Το ποσό της βιοφωταύγεια που παράγεται μετά την επιμόλυνση είναι ανάλογη με την ισχύ του προαγωγού , το οποίο είναι σημαντικό για την έρευνα και τη βιομηχανία , όπου η αυξημένη παραγωγή πρωτεΐνης είναι συμφέρουσα .
Η
εικόνων